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收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況：
如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，加新的 10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加0.5ml消化液（0.125%Trypsin-0.25mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)過來大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8mlDMEM＋１０％ＦＢＳ培養(yǎng)液或１-２ｍｌ胰酶抑制劑，吸入離心管，離心（１０００轉(zhuǎn)，6分鐘），棄上清， 加１０ｍｌＬＨＣ－８將細(xì)胞重懸，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二或三。
、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
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