銅綠假單胞菌（P.Aeruginosa）原稱(chēng)綠膿桿菌。在自然界分布廣泛，為土壤中存在的最常見(jiàn)的細(xì)菌之一。各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有本菌存在。本菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。
營(yíng)養(yǎng)瓊脂
盡可能將所有經(jīng)濾膜過(guò)濾后，在36℃±1℃培養(yǎng)了20h～24h，將需驗(yàn)證的可疑菌落劃線接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，于36℃±1℃培養(yǎng)20h～24h。檢查再次純化的菌落，并將最初顯紅褐色的菌落進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)。
氧化酶試驗(yàn)
取2 滴～3 滴新鮮配制的氧化酶試劑滴到放于平皿里的潔凈濾紙上。用鉑金絲接種環(huán)或玻璃棒，將適量的純種培養(yǎng)物涂布在預(yù)備好的濾紙上。在10s 內(nèi)顯深藍(lán)紫色的視為陽(yáng)性反應(yīng)。也可以按照商品化氧化酶測(cè)試產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行該項(xiàng)測(cè)試。
金氏B（King′s B）培養(yǎng)基
將上述呈紅褐色的且氧化酶反應(yīng)呈陽(yáng)性的培養(yǎng)物接種于金氏B 培養(yǎng)基上，于36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)1d～5d。每天需取出在紫外燈下檢查其是否產(chǎn)生熒光性，將5d 內(nèi)產(chǎn)生熒光的菌落記錄為陽(yáng)性。
乙酰胺肉湯
將5.4.1 中的純培養(yǎng)物接種到裝有乙酰胺肉湯的試管中，在36℃±1℃培養(yǎng)20h～24h。然后向每支試管培養(yǎng)物加入1 滴～2 滴鈉氏試劑，檢查各試管的產(chǎn)氨情況，如表現(xiàn)出從深黃色到磚紅色的顏色變化，則為陽(yáng)性結(jié)果，否則為陰性。
計(jì)數(shù)
將產(chǎn)生綠膿色（藍(lán)色/綠色）或氧化酶反應(yīng)呈陽(yáng)性，在紫外燈下產(chǎn)生熒光，且在乙酰胺肉湯中產(chǎn)氨的所有菌落證實(shí)為銅綠假單胞菌，并進(jìn)行計(jì)數(shù)。
通過(guò)計(jì)數(shù)培養(yǎng)后的濾膜上的菌落以獲得銅綠假單胞菌的數(shù)量。其他產(chǎn)生熒光或者呈紅棕色的菌落需要進(jìn)一步驗(yàn)證。
生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)
該菌在4℃不生長(zhǎng)而在42℃可以生長(zhǎng)。
生化鑒定
觸酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性；
365nm紫外燈下顯熒光。
乙酰胺肉湯實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性
分型
（1）噬菌體分型：所應(yīng)用的噬菌體現(xiàn)有24株，分型率達(dá)90%。
（2）血清學(xué)分型：利用O抗原進(jìn)行分型，可分20個(gè)血清型。
（3）質(zhì)粒指紋圖分析：此項(xiàng)技術(shù)是對(duì)同種細(xì)菌的不同株進(jìn)行同源性分析的一種方法。根據(jù)細(xì)菌攜帶質(zhì)粒的情況進(jìn)行分析
ATCC菌種：銅綠假單胞菌
Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula 菌株拉丁名
(ATCC? 47085?) 菌株編號(hào)
Strain Designations 菌株別名 PAO1-LACh
Biosafety Level 生物安全等級(jí) 2
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏方法