中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,特別是有大量分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl- Neelsen)抗酸染色法,以5% 石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。本菌無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛。是家畜、野生動(dòng)物、禽類及人類結(jié)核病的病原菌.
1.形態(tài)與染色特性
在動(dòng)物病灶內(nèi)的結(jié)核桿菌菌體正直或微彎曲,長(zhǎng)1.5~4.0um,寬0.2~0.5um.有時(shí)菌體末端具有不同的分枝,有的兩端鈍圓,無(wú)鞭毛,無(wú)莢膜和無(wú)芽孢,沒(méi)有運(yùn)動(dòng)性。單在,成雙.間或成叢排列.在人工培養(yǎng)基上,由于菌型.菌株和環(huán)境條件不同.可出現(xiàn)多種形態(tài).如近似球形.棒狀或絲狀.在電鏡下觀察本菌具有復(fù)雜結(jié)構(gòu):由微莢膜:細(xì)胞外殼的三層結(jié)構(gòu)、胞漿膜、胞漿.間體,核糖體及中間核質(zhì)構(gòu)成。 本菌為革蘭氏陽(yáng)性菌。一般苯胺染料難以著色。若用加熱或媒染劑處理使之染色后,可以抵抗鹽酸.酒精的脫色作用。萋-尼二氏對(duì)結(jié)核桿菌的抗酸染色法.就是根據(jù)這個(gè)道理進(jìn)行的,因?yàn)榻Y(jié)核桿菌中含有脂類,染料一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部很難脫出。用上述方法染色,結(jié)核桿菌被染成紅色,而其他非杭酸性菌和細(xì)胞雜質(zhì)均呈藍(lán)色。
2.培養(yǎng)特性
本菌為嚴(yán)格需氧菌;最適生PH6.5—6.8,最適生長(zhǎng)溫度為37~37.5℃。本菌生長(zhǎng)速度很慢,尢其是初代分離.在人工培養(yǎng)基上最快分裂速度為18h一代,一般1~2周才看見(jiàn)開(kāi)始生長(zhǎng).3~4周才能旺盛的發(fā)育。
結(jié)核桿菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求極高,必須在含有血清.雞蛋。甘油.馬鈴薯及某些無(wú)機(jī)鹽的特殊培養(yǎng)基上.才能良好地生長(zhǎng)。初代分離培養(yǎng),更是如此。在固體培養(yǎng)基上.菌落呈灰黃白色.干燥顆粒狀.顯著隆起.表面粗糙皺縮.菜花狀的菌落。在液體培養(yǎng)基內(nèi),于液面形成粗紋皺膜,培養(yǎng)基保持透明。若加入吐溫80于培養(yǎng)基中.可使結(jié)核桿菌呈分散均勻生長(zhǎng)。
3.生化特性
結(jié)核分枝桿菌不發(fā)酵糖類。與牛分枝桿菌的區(qū)別在于結(jié)核分枝桿菌可合成煙酸和還原硝酸鹽,而牛分枝桿菌不能。熱觸酶試驗(yàn)對(duì)區(qū)別結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌有重要意義。結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性,而熱觸酶試驗(yàn)陰性; 非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗(yàn)均陽(yáng)性。熱觸酶試驗(yàn)檢查方法是將濃的細(xì)菌懸液置68℃水浴加溫20分鐘,然后再加H2O2。觀察是否產(chǎn)生氣泡,有氣泡者為陽(yáng)性。