ATCC 11859 巴氏芽孢桿菌
培養(yǎng)溫度：30℃
培養(yǎng)時間 ：18-24 小時
一、培養(yǎng)基： CASO AGAR+20g/L 尿素
酪蛋白胨 15g
大豆蛋白胨 5g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1L
瓊脂1L
PH7.3
二、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。
三、注意事項
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無菌水溶解，接種在 2 支斜面上，因凍干粉處于休眠狀態(tài)，請勿接種多支斜面或平板，以避免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功；如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退；
3）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時和中國微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
四、單層凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3 滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口 處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥并抽真空保存的，，開啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是 用牛奶作為保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造 成復(fù)蘇不成功；
3、凍干菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來，請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間，直至菌種培養(yǎng)完成； 有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長，一般來說，菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
4、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、凍干管打開后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
五、傳播程序
1.使用單管＃1376肉湯（5至6 mL），用巴斯德或1.0 mL移液管取出約0.5至1.0 mL。 將整個顆粒再水化。
2.將此等分試樣轉(zhuǎn)移回肉湯管中。 好好混合。
3.將1.0mL懸浮液轉(zhuǎn)移至第二管發(fā)酵液中。 如果需要，從第二管中使用幾滴接種斜面和/或板。 用于冷凍＃干燥程序的冷凍保護(hù)劑可以抑制初級管中的生長，因此需要立即轉(zhuǎn)移。
4.將所有管和板在30℃下孵育48至72小時。 如果在瓊脂培養(yǎng)基上生長不重，此時從培養(yǎng)的培養(yǎng)液中進(jìn)行額外的轉(zhuǎn)移。