培養(yǎng)Hi-five昆蟲細(xì)胞注意事項(xiàng)-ATCC細(xì)胞庫
中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-08-10 09:11:06
培養(yǎng)Hi-five昆蟲細(xì)胞注意事項(xiàng)-ATCC細(xì)胞庫
資源名稱 ：Hi-five(BTI-TN-5B1-4)
種屬：昆蟲細(xì)胞
形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)基：Grace＇s Insect Medium (GIMw/oBSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)10%FBS
生長(zhǎng)特性 ：半貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞描述：Hi-five(BTI-TN-5B1-4)細(xì)胞是一株昆蟲細(xì)胞，主要用于昆蟲病毒的擴(kuò)增、病毒與宿主細(xì)胞相互作用的研究等。
傳代情況：C8
支原體檢測(cè)：陰性
Hi-five昆蟲細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
bio-69628 Homo sapiens (human) 0.2ml
bio-69638 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-81007 CCD-34Lu CCD-34Lu frozen
bio-69639 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-72860 WS1 Homo sapiens, human frozen
bio-69634 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69648 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69627 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-74691 HK-2 Homo sapiens, human
bio-69636 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69645 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69649 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-00672 A20 [A-20] ATCC TIB-208
bio-69637 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-74689 U-2 OS Homo sapiens, human
bio-74149 HMEC-1 Homo sapiens, human frozen
bio-69640 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-74690 MIA PaCa-2 Homo sapiens, human
bio-69631 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69630 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69647 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-74210 HEp-2 Homo sapiens, human
bio-74408 L-M s musculus, mouse
bio-69642 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69626 Homo sapiens (human) 0.2ml
bio-69641 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-80241 HULEC-5a Homo sapiens, human frozen
bio-69650 Homo sapiens (human) 0.1ml
bio-69644 Homo sapiens (human) 0.2ml
bio-69646 Homo sapiens (human) 0.1ml
特別注意：該細(xì)胞為半貼壁懸浮細(xì)胞，由于密度較大，可能存渾濁狀態(tài)，務(wù)必不要扔，轉(zhuǎn)到細(xì)胞瓶后培養(yǎng)顯微鏡觀察，可確定沒有污染。