操作前必須嚴(yán)格、規(guī)范地洗手和消毒(通常使用70-75%酒精或?qū)S孟緞?/div>
操作時(shí)需佩戴無菌手套,并在整個(gè)關(guān)鍵操作過程中保持手套的無菌性(避免觸碰非無菌表面)。
動(dòng)作要準(zhǔn)確、迅速、輕柔,減少空氣流動(dòng)和產(chǎn)生氣溶膠。
避免對(duì)著樣品說話、咳嗽或打噴嚏。
5、無菌技術(shù):
火焰滅菌:在無菌區(qū)域外操作時(shí),常使用酒精燈或本生燈對(duì)工具(如鑷子、剪刀、容器口)進(jìn)行火焰滅菌。
避免交叉污染:無菌器具只能接觸無菌物品或樣品本身,接觸后即視為有污染風(fēng)險(xiǎn),不可再直接接觸其他無菌物品。
最小化暴露:無菌容器僅在需要放入樣品時(shí)才打開,打開后應(yīng)盡量保持容器口向下或處于保護(hù)狀態(tài)(如在火焰附近),并盡快關(guān)閉。
無菌轉(zhuǎn)移:樣品從一個(gè)無菌容器轉(zhuǎn)移到另一個(gè)時(shí),需確保轉(zhuǎn)移路徑和工具的無菌性。
二、無菌取樣的關(guān)鍵步驟:
1、準(zhǔn)備:
明確取樣目的、樣品類型和所需體積/數(shù)量。
準(zhǔn)備并確認(rèn)所有所需無菌器具、容器、運(yùn)輸介質(zhì)(如適用)均已滅菌且在有效期內(nèi)。
穿戴好個(gè)人防護(hù)裝備(PPE),并進(jìn)行手部消毒。
準(zhǔn)備好消毒劑用于樣品接觸點(diǎn)的消毒。
設(shè)定好無菌工作區(qū)域(如開啟超凈臺(tái)/生物安全柜并運(yùn)行足夠時(shí)間)。
2、取樣點(diǎn)消毒(如適用):對(duì)于需要從特定表面或開口(如瓶口、罐口、管道接口、皮膚穿刺點(diǎn))取樣的,必須先用合適的消毒劑對(duì)接觸點(diǎn)進(jìn)行徹底消毒,并等待其完全干燥,以避免消毒劑殘留抑制微生物或污染樣品。
3、取樣操作:
在無菌區(qū)域(如超凈臺(tái)內(nèi))或嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范進(jìn)行。
打開無菌容器或包裝時(shí),注意手法,避免手或非無菌物品接觸內(nèi)部或邊緣。
使用無菌工具(鑷子、注射器、拭子等)獲取樣品。
操作迅速、準(zhǔn)確,避免工具或樣品在空氣中暴露過久。
避免手部或非無菌物體越過打開的容器或樣品上方。
取樣工具只能接觸樣品一次,如需再次取樣,應(yīng)更換新工具。
4、樣品封裝:
將取得的樣品立即、小心地放入無菌容器中。
確保容器密封良好,防止泄漏和后續(xù)污染。
在容器上清晰、準(zhǔn)確地標(biāo)記樣品信息(如樣品編號(hào)、名稱、取樣日期時(shí)間、取樣人、取樣位置等)。
5、運(yùn)輸與儲(chǔ)存:
根據(jù)樣品特性和檢測(cè)要求,在規(guī)定的條件下(如冷藏、冷凍、常溫避光)及時(shí)運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。
使用合適的運(yùn)輸容器(如保溫箱+冰袋),確保運(yùn)輸過程不會(huì)破壞樣品的無菌狀態(tài)或影響目標(biāo)微生物的存活。
6、記錄:
詳細(xì)記錄取樣過程,包括取樣時(shí)間、地點(diǎn)、方法、使用的器具、消毒方法、操作人員、環(huán)境條件(如潔凈度級(jí)別)、樣品標(biāo)識(shí)、運(yùn)輸條件等。這對(duì)于結(jié)果追溯和質(zhì)量控制至關(guān)重要。
三、應(yīng)用場(chǎng)景舉例:
醫(yī)療:采集血液、腦脊液、尿液、膿液、組織活檢樣本用于微生物培養(yǎng)。
制藥:在生產(chǎn)過程中或最終產(chǎn)品中取樣進(jìn)行無菌檢查、微生物限度檢查、內(nèi)毒素檢測(cè)。
生物制品/細(xì)胞治療:細(xì)胞培養(yǎng)物的傳代、凍存或檢測(cè)取樣。
食品與飲料:原料、生產(chǎn)線(設(shè)備表面、中間產(chǎn)品、水、空氣)、成品的微生物檢測(cè)取樣。
化妝品:成品或原料的微生物檢測(cè)取樣。
環(huán)境監(jiān)測(cè):潔凈室/區(qū)的空氣、表面、人員(接觸碟)的微生物監(jiān)測(cè)取樣。
科研:無菌動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、無菌培養(yǎng)基配制、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(避免DNA酶/RNA酶污染也類似無菌概念)。
四、總結(jié):
無菌取樣是一項(xiàng)需要高度嚴(yán)謹(jǐn)性、規(guī)范操作和豐富經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)。它要求操作者深刻理解無菌概念,熟練掌握無菌操作技術(shù),并在每個(gè)細(xì)節(jié)上都嚴(yán)格遵守規(guī)程。任何環(huán)節(jié)的疏忽都可能導(dǎo)致取樣失敗,得到不可靠的結(jié)果,甚至造成嚴(yán)重后果。因此,接受專業(yè)培訓(xùn)、遵循標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)并進(jìn)行充分的實(shí)踐是保證無菌取樣成功的關(guān)鍵。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù),對(duì)購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位,都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)!也正因?yàn)榇?,北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系!
下載附件
上一篇:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中PBS緩沖液的主要用途與使用方法及注意事項(xiàng)!
下一篇:潔凈室微生物環(huán)境檢測(cè)易出現(xiàn)的問題及關(guān)鍵的解決策略!