為何培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢,任何改進(jìn)?。ㄞD(zhuǎn)沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)購(gòu)買者心得)
我是沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)的,4月在中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)訂購(gòu)了一支293T 人胚腎細(xì)胞 ,他們實(shí)驗(yàn)室老師1周左右復(fù)蘇好然后郵寄過來的,我這邊收到細(xì)胞后就倒置在顯微鏡下觀察,當(dāng)時(shí)的新報(bào)狀態(tài)還行,由于當(dāng)時(shí)細(xì)胞還沒有長(zhǎng)慢,這邊就是換了我們自己配置的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),但是后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)的有點(diǎn)慢,(因?qū)嶒?yàn)經(jīng)驗(yàn)不足就電話咨詢培養(yǎng)老師 老師一聽說我們這邊更換了不同培養(yǎng)液有關(guān))于是才了解,只是感概初學(xué)者一定要先了解一下細(xì)胞生長(zhǎng)慢的原因,對(duì)癥下藥。
1,由于更換不同培養(yǎng)液或血清,
2,培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分
3,如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺,乏或已被破壞。
4,培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染
5,試劑保存不當(dāng)
我們應(yīng)該如何處理:
1,比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。
2,增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3,換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4,補(bǔ)加谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子。
5,用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;?span>用抗生素除菌。
6,血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在 2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在 2-8℃保存,并在 2 周內(nèi)用完。