S180 小鼠惡性肉瘤細(xì)胞
微生物菌種查詢網(wǎng) / 2015-06-05 07:52:37
細(xì)胞庫（KCB）編號(hào)：KCB93029YJ
種屬：小鼠
性別：雄
組織來源：腹水
生長特性：半懸浮
形態(tài)特征：淋巴細(xì)胞樣，圓形
微生物，支原體檢測：陰性
安全性：所有腫瘤細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件：
完全培養(yǎng)基： RPMI1640（內(nèi)含2mM L-glutamine）10%胎牛血清
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法：
收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。之后用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液到無菌的離心管內(nèi)，1000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘后棄上清，加新配的完全培養(yǎng)液10ml接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)（如果細(xì)胞多，也可接種兩瓶）。原瓶換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代時(shí)，只要輕拍培養(yǎng)瓶后加夠培養(yǎng)液一分為二即可。如果有些細(xì)胞拍打不下來，可按以下方法做：
1.吸出拍打下的細(xì)胞懸液，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后將培養(yǎng)瓶翻過來讓胰酶與細(xì)胞面接觸大約10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加6-8ml/瓶完全培養(yǎng)基即可。
注：1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請及時(shí)與我們聯(lián)系。
凍存方法：
凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO.現(xiàn)用現(xiàn)配
上一篇：4.6 金霉素鏈霉菌
下一篇：為何培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢，如何改進(jìn)！