菌種名稱 ： 腦膜炎奈瑟菌
Neisseria meningitidis 菌株拉丁名
(Albrecht and Ghon) Murrayvb
(ATCC? 13095?) 菌株編號
Permits and Restrictions View Permits
Strain Designations ATCC菌種 別名 M55 [1]
Isolation分離源 Spinal fluid
Biosafety Level生物安全等級 2
生物學性狀
形態(tài)與染色
腦膜炎奈瑟菌為革蘭染色陰性，常呈雙排列，直徑約為0.8μm的雙球菌。單個菌體呈腎形。成雙排列時，兩個凹面相對。無鞭毛，不形成芽胞。有菌毛，新分離菌株有莢膜。
培養(yǎng)特性
專性需氧。營養(yǎng)要求高。最常用的培養(yǎng)基是巧克力色培養(yǎng)基。即將血液加熱80℃后制成的血瓊脂培養(yǎng)基。初次分離培養(yǎng)時，還需提供5%～10%的CO2氣體。一般培養(yǎng)48小時后，腦膜炎奈瑟菌在培養(yǎng)基上形成圓形隆起、表面有光澤、透明或半透明、直徑約1mm～5mm的露滴樣粘液型菌落。無色素形成。血平板上無溶血現(xiàn)象。
生化反應
分解糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。氧化酶試驗陽性。腦膜炎奈瑟菌可產(chǎn)生自溶酶，人工培養(yǎng)時若不及時移種，數(shù)日后菌體自溶。
抗原構造及分類
1．莢膜多糖抗原（capsular polysaccharides antigen） 具有群特異性。根據(jù)此抗原性不同，可將腦膜炎奈瑟菌分為至少13個血清群。與人類疾病關系密切的主要是A、B、C、Y及W-135群。A群及C群是引起腦膜炎流行的主要血清群。
2．外膜蛋白（outer membrane protein） 具有型特異性。根據(jù)外膜蛋白不同將腦膜炎奈瑟菌分為20個血清型。2型和15型與流行性腦脊髓膜炎有關。外膜蛋白的功能是在細菌細胞壁上形成孔隙，有利于營養(yǎng)物質進入細胞內。
3．脂多糖抗原（lipopolysaccharide antigen， LPS） 此抗原與大腸桿菌有共同抗原存在。脂多糖是腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質。
抵抗力
腦膜炎奈瑟菌對外界環(huán)境的抵抗力弱。干燥、陽光、濕熱及一般消毒劑很快將細菌殺死。本菌可產(chǎn)生自溶酶。體外25℃，堿性環(huán)境中很快導致菌體腫脹、裂解死亡。
微生物學檢查
標本
取患者腦脊液或刺破皮膚出血瘀斑取滲出物作涂片或培養(yǎng)。血液標本作培養(yǎng)。帶菌者檢測可取鼻咽拭子。
直接涂片鏡檢
腦脊液離心沉淀后，取沉淀物涂片，革蘭染色后鏡檢。或消毒患者皮膚出血瘀斑處皮膚，用無菌針頭挑破瘀斑取滲出物制成涂片，革蘭染色后鏡檢。如鏡下見到中性粒細胞內、外有革蘭染色陰性雙球菌時，即可作出初步診斷。
分離培養(yǎng)與鑒定
血液與腦脊液標本在血清肉湯培養(yǎng)基中增菌后，接種到巧克力色血瓊脂平板上，置于含5%～10%CO2的環(huán)境中孵育。挑取可疑菌落涂片鏡檢，并作生化反應（表13-1）及型特異性多價血清的凝集試驗鑒定。
生化鑒定
主要通過氧化酶、糖類發(fā)酵以及培養(yǎng)生長特點進行。
①細菌形態(tài)呈腎形；
②氧化酶試驗陽性；
③觸酶試驗陽性；
④分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；
⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗。
血清凝集法
根據(jù)莢膜多糖可將腦膜炎奈瑟氏菌分為A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13個血清群，其中A、B、C群最為多見，約占90%。
關于血清凝集法用的診斷血清方面，推薦天津生物芯片公司生產(chǎn)的腦膜炎奈瑟氏菌全套診斷血清產(chǎn)品。這套產(chǎn)品除了包含腦膜炎奈瑟氏菌菌10個常見血清群的診斷血清。
核酸擴增法
流行性腦膜炎的臨床診斷通常以出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐、頭痛等臨床癥狀為依據(jù)。進一步的確診則需在病人腦脊液或急性衄液中分離到腦膜炎雙球菌。但分離培養(yǎng)方法的檢出陽性率較低．并且至少需要2～3 d才能確診感染．這對疾病的及時治療極為不利。此外，受抗生素使用及其他非特異性因素的影響．分離培養(yǎng)法的靈敏度不高．極大地降低了診斷結果的可靠性。因此，尋找一種快速、靈敏并且適用于I臨床診斷的檢測方法已顯得非常鶯要。近年來，因為具有特異性好、靈敏度高、檢測周期短等優(yōu)點，在PCR的基礎上建立的基因診斷技術已廣泛應用于多種病原微生物的臨床檢測。四川大學華西公共衛(wèi)生學院聯(lián)合四川省疾病預防控制中心以PCR技術為基礎，結合我國流腦的流行現(xiàn)狀，建立了Nm ABC群的快速診斷方法 [1] 。
核酸擴增技術，即聚合酶鏈式反應（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是設計、合成兩條寡核苷酸，作為引物，對應于待測病原微生物某一段特異性序列的兩端，然后在體外模擬DNA體內復制的過程反復擴增，使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。
快速診斷法
依據(jù)是腦膜炎患者腦脊液及血清中存在腦膜炎奈瑟菌可溶性抗原。因此可采用已知的抗體檢測有無相應的抗原。
1．對流免疫電泳：此法較常規(guī)培養(yǎng)法敏感，特異性高。一般1小時內即可得到結果。
2．SPA協(xié)同凝集試驗：將待檢的患者腦脊液或血清與已知腦膜炎奈瑟菌IgG類抗體標記的產(chǎn)生SPA的金黃色葡萄球菌混合。若標本中存在腦膜炎奈瑟菌的可溶性抗原，則使抗體標記的金黃色葡萄球菌聚集在一起，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。