看中國微生物菌種查詢網(wǎng)對革蘭陽性球的菌鑒定-ATCC菌種
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-10-26 08:34:07
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一、 革蘭陽性球菌的基本特征
在血瓊脂平板上生長，但在麥康凱、伊紅亞甲藍(lán)、中國藍(lán)瓊脂平板上不生長，提示為革蘭陽性球菌。但有些非發(fā)酵菌(如：艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬等)在麥康凱平板上也不生長。
二、革蘭陽性球菌的基本鑒定試驗要求
觸酶試驗是鑒定革蘭陽性球菌的重要試驗(任何革蘭陽性球菌必須先做觸酶試驗) ，此試驗不宜碰到血瓊脂，因為紅細(xì)胞內(nèi)含有過氧化物酶，操作過程中若沾染紅細(xì)胞可造成假陽性。
凝固酶試驗是鑒定葡萄球菌的重要試驗，此試驗有玻片法和試管法。須注意以下幾點。
(1 ) 有些葡萄球菌(昂和葡萄球菌、施氏葡萄球菌)凝固酶試驗玻片法陽性，試管法驗證陰性，因其產(chǎn)生聚集因子。有些金黃色葡萄球菌玻片法陰性，試管法陽性，因該金黃色葡萄球菌無結(jié)合凝固酶，有游離凝固酶。
(2) 試驗可使用EDTA 抗凝的兔血漿，不能使用枸櫞酸鹽抗凝，因為有些細(xì)菌可分解枸櫞酸鹽，可出現(xiàn)假陽性。
(3)高鹽甘露醇瓊脂平板上的菌落不能用于凝固酶試驗，因高鹽可致菌體自凝。
三、 作為推測性鑒定的重要試驗
1.菌落特征
(1)溶血： 血平板上的溶血有助于一些細(xì)菌的初步鑒定，如金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬等。
α 溶血: α溶血使菌落周圍的血液部分溶解，其結(jié)果是菌落周圍有一個草綠色的環(huán)，疑似肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌。
?溶血: ? 溶血菌落周圍的血液完全溶血，是由于紅細(xì)胞完全被溶解所致，如A 群?溶血鏈球菌(化膿性鏈球菌)產(chǎn)生寬闊清晰的溶血環(huán)；B群?溶血鏈球菌(無乳鏈球菌)和產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌產(chǎn)生一個狹窄的分散溶血環(huán)。
(2) 衛(wèi)星現(xiàn)象: 乏養(yǎng)菌屬、Granulicatella elegans
2 . 鏡下形態(tài)
(1)革蘭陽性球形、葡萄狀、單個、成雙的疑似葡萄球菌屬。
(2) 革蘭陽性球狀、球桿狀、鏈狀(短鏈)排列、鏈的長短不一(液體培養(yǎng)基中為長鏈，固體培養(yǎng)基中為短鏈，短鏈由4~8 個細(xì)菌組成、長鏈可達(dá)20~30 個)的疑似鏈球菌屬。
(3) 革蘭陽性矛頭狀、成雙或短鏈排列的疑似肺炎鏈球菌。
(4) 革蘭陽性球桿狀、成雙、鏈狀的疑似乳球菌屬、明串珠球菌屬、格魯比卡菌屬等。
(5) 革蘭陽性球狀、球桿狀的疑似乏養(yǎng)菌屬等。
(6) 革蘭陽性球狀、成雙、鏈狀、成簇的疑似氣球菌屬、孿生球菌屬、創(chuàng)傷球菌屬、片球菌屬等。
(7)革蘭陽性球桿狀、成雙、四聯(lián)狀的疑似差異球菌屬等。
(8) 革蘭陽性球狀、成雙、成簇的疑似口腔球菌屬等。
(9) 革蘭陽性球狀、成簇、四聯(lián)狀的疑似微球菌屬等。
注: 溶血孿生球菌扁平的側(cè)面相鄰，常是雙球狀。
3 . 觸酶試驗
(1)觸酶試驗陰性的革蘭陽性球菌: 金黃色葡萄球菌厭氧亞種、解糖葡萄球菌、鏈球菌屬、腸球菌屬、乏養(yǎng)菌屬、氣球菌屬、狡詐球菌屬、費(fèi)克藍(lán)姆菌屬 、孿生球菌屬、格魯比卡菌屬、創(chuàng)傷球菌屬 、Lgnavigranum 、乳球菌屬、明串珠球菌屬(Leuconostoc) 、足球菌屬(Pediococcus) 、Granulicatella 、Tetragenococcus 、Vagococcus 。
(2) 觸酶試驗陽性的革蘭陽性球菌：葡萄球菌屬、微球菌屬、口腔球菌屬、動球菌屬、克氏考可菌屬、差異球菌屬、Rothia mucilaginosa等。
4 . 凝固酶試驗?zāi)堂冈囼炾栃缘钠咸亚蚓航瘘S色葡萄球菌金黃色亞種、金黃色葡萄球菌厭氧亞種、施氏葡萄球菌聚集亞種、中間葡萄球菌、S. Lutrae 、豬葡萄球菌（l l % ~89 % 陽'性) 。值得注意的是，如果菌落特征、鏡下形態(tài)符合葡萄球菌、觸酶陰性，應(yīng)先用準(zhǔn)確的方法作凝固酶試驗，陽性為金黃色葡萄球菌慶氧亞種，陰性再進(jìn)一步鑒定。
5 . 高鹽甘露醇試驗 高鹽甘露醇試驗陽性的葡萄球菌： 金黃色葡萄球菌。但有報道，少見的葡萄球菌也能分解高鹽甘露醇，故應(yīng)用凝固酶試驗驗證。
6. CAMP 試驗 CAMP 試驗陽性的革蘭陽性球菌： B 群(無乳)鏈球菌。
7. 吡咯烷酮芳基酰接酶(PYR) 試驗陽性的革蘭陽性球菌： 腸球菌、化膿鏈球菌、草綠色氣球菌和某些凝固酶陰性葡萄球菌等。直接取細(xì)菌培養(yǎng)物，涂在含有PYR 的紙片上，置35℃孵育5 min ，滴加顯色劑若陽性則可顯紅色，無顏色改變?yōu)殛幮浴?br />
8 . 觸酶試驗 觸酶陰性革蘭陽性球菌的鑒定
9. 雙歧法試驗 常見凝固酶陰性葡萄球菌的鑒定
10. 桿菌肽敏感試驗 桿菌肽敏感的革蘭陽性球菌： A 群鏈球菌(化膿性鏈球菌) 。
11. Optochin 試驗 Optochin 試驗陽性的革蘭陽性球菌：肺炎鏈球菌。