創(chuàng)傷弧菌屬革蘭氏陰性弧菌。在液體培養(yǎng)基中菌體大小為0.7*2-3μm,稍彎曲。在固體培養(yǎng)基中呈多樣性。有極端單鞭毛。 培養(yǎng)特性:營(yíng)養(yǎng)要求一般,最適生長(zhǎng)溫度為30℃,兼性厭氧。在無(wú)NaCl及超過8%NaCl的培養(yǎng)基中不生長(zhǎng),可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生長(zhǎng),在含6%NaCl的蛋白胨水中生長(zhǎng)良好.
非冷凍樣品采集后應(yīng)立即置7℃~10℃冰箱保存,盡可能及早檢驗(yàn);冷凍樣品應(yīng)在45 ℃以下不超過15 min或在2℃~5℃不超過18 h解凍;如果樣品需要冷凍貯存,應(yīng)在樣品中加等量緩沖甘油-氯化鈉溶液(液體樣品應(yīng)加雙料),推薦貯存溫度為-70 ℃以下。
甲殼類,則應(yīng)先在自來(lái)水中洗刷外殼并甩干表面水分,然后以無(wú)菌操作打開外殼,按上述要求取相應(yīng)部分。
以無(wú)菌操作取檢樣25 g(mL),加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8 000 r/min均質(zhì)1 min,或拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min,制備成1:10的均勻稀釋液。如無(wú)均質(zhì)器,則將樣品放入無(wú)菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的滅菌容器內(nèi),加225 mL 3%氯化鈉堿性蛋白胨水,并充分振蕩。魚類和頭足類動(dòng)物取表面組織、腸或鰓。貝類取全部?jī)?nèi)容物,包括貝肉和體液;甲殼類取整個(gè)動(dòng)物,或者動(dòng)物的中心部分,包括腸和鰓。
嗜鹽性試驗(yàn):挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落,分別接種于不同氯化鈉濃度的胰胨水,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h,觀察液體混濁情況。創(chuàng)傷弧菌在無(wú)氯化鈉、8%氯化鈉和10%氯化鈉的胰胨水中不生長(zhǎng),在6%氯化鈉的胰胨水中生長(zhǎng)旺盛。
氧化酶試驗(yàn):挑選純培養(yǎng)的單個(gè)菌落進(jìn)行氧化酶試驗(yàn),創(chuàng)傷弧菌為氧化酶陽(yáng)性。
涂片鏡檢:將可疑菌落涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,鏡檢觀察形態(tài)。創(chuàng)傷弧菌為革蘭氏陰性,呈棒狀或弧狀。
挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落,轉(zhuǎn)種3%氯化鈉三糖鐵瓊脂斜面并穿刺底層,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果。創(chuàng)傷弧菌在3%氯化鈉三糖鐵瓊脂中的反應(yīng)為底層變黃不變黑,無(wú)氣泡,斜面顏色不變或紅色加深,偶爾斜面變黃。
V-P試驗(yàn):以接種針由3%氯化鈉三糖鐵瓊脂斜面挑取少許培養(yǎng)物穿刺3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基,36℃±1 ℃培養(yǎng)24 h,在加V-P試劑前應(yīng)先觀察動(dòng)力。沿穿刺線周圍呈擴(kuò)散性生長(zhǎng)為動(dòng)力陽(yáng)性。
ATCC菌種名稱:創(chuàng)傷弧菌
Vibrio vulnificus (Reichelt et al.) Farmer emend. West et al. 拉丁名
(ATCC? 27562?) 菌種編號(hào)
Strain Designations 菌種別名: 324 [CDC B9629] /
Type Strain 菌株編號(hào): yes /
Biosafety Level 生物安全等級(jí) : 2
Strain Designations 菌種別名 324 [CDC B9629]
Application 用途
Control Culture
Produces hemolysins
Control strain for detection of Vibrio vulnificus
Characterization
Enteric Research
Waterborne pathogen research
Isolation分離源 Human blood, Florida, United States
Type Strain 模式菌株 yes
Biosafety Level 生物安全等級(jí) 2
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏方法
Frozen(冷凍物): -80℃ or colder
Freeze-Dried(凍干物): 2℃ to 8℃
Live Culture: See Propagation Section
Preceptrol? no
Type Strain 模式菌株yes
Comments 注釋 Electrophoretic analysis of lipopolysaccharides
Medium 培養(yǎng)基 ATCC? Medium 2: Marine agar 2216 or marine broth 2216
Growth Conditions 生長(zhǎng)條件
Temperature 培養(yǎng)溫度 : 30℃
Atmosphere 需氧情況 : Aerobic
Name of Depositor 收藏者 P Baumann
Chain of Custody 來(lái)源國(guó)家 ATCC <-- P Baumann <-- RE Weaver
Isolation 分離源 Human blood, Florida, United States
References 參考文獻(xiàn) Okada K, et al. Variability of haemolysin(s) produced by Vibrio vulnificus. J. Gen. Microbiol. 133: 2853-2857, 1987. PubMed: 3449599
Farmer JJ III. Vibrio ("Beneckea") vulnificus, the bacterium associated with sepsis, septicaemia, and the sea. Lancet 2: 903, 1979. PubMed: 90993
Reichelt JL, et al. Study of genetic relationships among marine species of the genera Beneckea and Photobacterium by means of in vitro DNA/DNA hybirization. Arch. Microbiol. 110: 113-114, 1976.
Farmer III JJ. Revival of the name Vibrio vulnificus. Int. J. Syst. Bacteriol. 30: 656, 1980.
Validation list no. 2. Int. J. Syst. Bacteriol. 29: 79-80, 1979. Tison DL, et al. Vibrio vulnificus biogroup 2: new biogroup pathogenic for eels. Appl. Environ. Microbiol. 44: 640-646, 1982. PubMed: 7138004
Amaro C, et al. Electrophoretic analysis of heterogeneous lipopolysaccharides from various strains of Vibrio vulnificus biotypes 1 and 2 by silver staining and immunoblotting. Curr. Microbiol. 25: 99-104, 1992. PubMed: 1283727