歡迎訪問中國微生物菌種查詢網(wǎng)，本站隸屬于北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司，單位現(xiàn)提供微生物菌種及其細胞等相關(guān)產(chǎn)品查詢、咨詢、訂購、售后服務(wù)！與國內(nèi)外多家研制單位，生物醫(yī)藥，第三方檢測機構(gòu)，科研院所有著良好穩(wěn)定的長期合作關(guān)系！
一、枯草芽孢桿菌的自然轉(zhuǎn)化模式
1、 細菌生長在一定的培養(yǎng)條件下生長到一定階段，以枯草芽孢桿菌為例是在葡萄糖基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)到對數(shù)生長末期到穩(wěn)定期，細胞向胞外分泌一種小分子的蛋白質(zhì)，稱為感受態(tài)因子，其分子量為 5000到 10000道爾頓。
2、 當(dāng)培養(yǎng)液中的感受態(tài)因子積累到一定濃度后，與細胞表面受體相互作用，通過一系列信號傳遞系統(tǒng)誘導(dǎo)一些感受態(tài)一特異蛋白質(zhì)(competence specific protein)表達，其中一種是自溶素(autolysin)，它的表達使細胞表面的 DNA 結(jié)合蛋白及核酸酶裸露出來，使其具有與 DNA 結(jié)合的活性。
3、DNA 以雙鏈形式在細胞表面的幾個位點上結(jié)合并遭到核酸酶的切割，核酸內(nèi)切酶首先切斷 DNA 雙鏈中的一條鏈，被切斷的鏈遭到核酸酶降解，成為寡核苷酸釋放到培養(yǎng)基中，另一條鏈與感受態(tài)一特異蛋白質(zhì)結(jié)合，并被引導(dǎo)進入細胞，
4、 進入細胞的外源 DNA 通過同源重組以置換的方式整合進受體染色體 DNA，經(jīng)復(fù)制和細胞分裂后形成重組體。
二、枯草芽孢桿菌的自然轉(zhuǎn)化特點
1、 枯草芽孢桿菌等革蘭氏陽性菌細胞對雙鏈 DNA 的吸附和攝取是沒有特異性的，轉(zhuǎn)化是否成功及轉(zhuǎn)化效率的高低主要取決于轉(zhuǎn)化給體菌株和轉(zhuǎn)化受體菌株之間的親源關(guān)系，關(guān)系越近，則 DNA 之間的同源性也越高，就越容易在 DNA 之間發(fā)生重組，產(chǎn)生轉(zhuǎn)化子。
2、自然感受態(tài)除了對線型染色體 DNA分子的攝取外，也能攝取質(zhì)粒 DNA，但在通常情況下質(zhì)粒的自然轉(zhuǎn)化效率要低得多， 這是因為質(zhì)粒作為細菌染色體外獨立存在的遺傳物質(zhì)和染色體 DNA同源性很差（否則會因為和染色體 DNA之間的重組而不穩(wěn)定） ，這樣被切割成單鏈后進入細胞的質(zhì)粒 DNA 將很難通過重組重新恢復(fù)成有活性的狀態(tài)（雙鏈閉合環(huán)狀） ，或通過整合進染色體而使相關(guān)性狀得到表達；如要提高質(zhì)粒的自然轉(zhuǎn)化效率，可以用二種方法：i）使質(zhì)粒形成多聚體，這樣進入細胞后重新組合成有活性的質(zhì)粒的幾率大大提高；ii）在質(zhì)粒上插入受體菌染色體的部分片段，或?qū)①|(zhì)粒轉(zhuǎn)化進含有與該質(zhì)粒具有同源區(qū)段的質(zhì)粒的受體菌重組獲救。
3、 噬菌體 DNA 也可被感受態(tài)細胞攝取并產(chǎn)生有活性的病毒顆粒，這個過程被稱為轉(zhuǎn)染(transfection)，其特點是提純的噬菌體 DNA以轉(zhuǎn)化的（而非病毒感染）途徑進入細胞并表達后產(chǎn)生完整的病毒顆粒。 現(xiàn)在把 DNA轉(zhuǎn)移至動物細胞的過程也稱轉(zhuǎn)染。