曲霉素瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基的原理與觀察現(xiàn)象及使用注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-11-19 09:24:07
一、培養(yǎng)基原理
營養(yǎng)供給：以蛋白胨、酵母浸粉等為基礎(chǔ)，提供微生物生長所需的碳源、氮源和維生素。
選擇性作用：部分配方添加氯霉素等抗生素，抑制革蘭氏陰性菌等雜菌生長，聚焦目標(biāo)真菌（如
曲霉屬）。
鑒別機(jī)制：含特定底物（如察氏培養(yǎng)基成分），曲霉素產(chǎn)生菌代謝后會改變培養(yǎng)基 pH 或產(chǎn)生特征色素，實(shí)現(xiàn)鑒別。
二、觀察現(xiàn)象
菌落形態(tài)：陽性菌株（如
黃曲霉）多形成絨毛狀、絮狀菌落，顏色從白色逐漸轉(zhuǎn)為黃色、綠色等。
培養(yǎng)基變化：部分菌株代謝產(chǎn)生的有機(jī)酸會使指示劑變色（如中性紅變紅），或產(chǎn)生水溶性色素?cái)U(kuò)散至培養(yǎng)基中。
陰性結(jié)果：雜菌被抑制不生長，或非曲霉素產(chǎn)生菌形成無特征性的普通菌落，培養(yǎng)基無特殊變化。
三、曲霉素瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基的使用注意事項(xiàng)
1、配制過程注意事項(xiàng)
稱量精準(zhǔn)：按配方比例準(zhǔn)確稱取培養(yǎng)基成分，避免因濃度偏差影響微生物生長。
溶解充分：加入指定量蒸餾水后，加熱并不斷攪拌，確保所有成分完全溶解，防止局部濃度過高。
pH 調(diào)節(jié)：滅菌前用酸堿溶液校正 pH 至規(guī)定范圍（通常為 5.6-6.0），pH 偏差會抑制目標(biāo)菌生長。
滅菌規(guī)范：采用高壓蒸汽滅菌（121℃、15-20 分鐘），滅菌后迅速冷卻至 45-50℃，避免營養(yǎng)成分破壞。
2、接種與培養(yǎng)注意事項(xiàng)
無菌操作：接種前需對培養(yǎng)基、接種工具（接種環(huán)、移液管）徹底滅菌，接種過程在超凈工作臺進(jìn)行，防止雜菌污染。
傾注溫度：倒平板時(shí)培養(yǎng)基溫度不宜過高（避免燙傷菌種）或過低（防止凝固無法均勻鋪板）。
接種量控制：按實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整接種量，過量可能導(dǎo)致菌落密集重疊，影響觀察；過少則難以分離到目標(biāo)菌。
培養(yǎng)條件：置于 25-28℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng) 3-7 天，保持培養(yǎng)環(huán)境濕度適宜，避免培養(yǎng)基干裂。
3、結(jié)果觀察與安全注意事項(xiàng)
觀察時(shí)機(jī)：按時(shí)段觀察菌落形態(tài)和培養(yǎng)基變化，避免培養(yǎng)時(shí)間過長導(dǎo)致菌落過度生長或色素?cái)U(kuò)散干擾判斷。
安全防護(hù)：曲霉素可能具有毒性和致癌性，操作時(shí)需佩戴手套、口罩，避免直接接觸菌株和培養(yǎng)基。
廢棄物處理：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有接觸過菌株的培養(yǎng)基、工具需高壓滅菌處理，防止污染環(huán)境和人員接觸風(fēng)險(xiǎn)。
儲存條件：未滅菌的培養(yǎng)基干粉密封存放于陰涼干燥處，避免受潮結(jié)塊；滅菌后的平板需倒置冷藏（4℃），1 周內(nèi)使用完畢。
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