TGC培養(yǎng)基：廣泛應(yīng)用于臨床微生物學(xué)和工業(yè)微生物檢測
小楊 / 2025-07-09 09:28:47
TGC 培養(yǎng)基（Thioglycollate Medium）是一種用于培養(yǎng)厭氧、微需氧和需氧微生物的通用液體培養(yǎng)基，尤其適用于厭氧菌的分離、培養(yǎng)和活力檢測。其核心原理是通過化學(xué)物質(zhì)創(chuàng)造梯度氧環(huán)境，滿足不同氧需求微生物的生長，廣泛應(yīng)用于臨床微生物學(xué)和工業(yè)微生物檢測。
一、TGC 培養(yǎng)基的原理
TGC 培養(yǎng)基的核心設(shè)計圍繞 “氧梯度環(huán)境” 構(gòu)建，主要通過以下成分實現(xiàn)：
1、硫代乙醇酸鈉（Thioglycollate）
這是培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分，作為還原劑可消耗環(huán)境中的氧氣，降低培養(yǎng)基的氧化還原電位。其濃度通常為 0.05%~0.2%，能在培養(yǎng)基中形成從表面到底部的氧梯度：
培養(yǎng)基表層因接觸空氣，氧氣含量較高，適合需氧菌生長；
中層氧氣含量較低，適合微需氧菌生長；
底層幾乎無氧（還原環(huán)境），適合厭氧菌生長。
2、瓊脂（Agar）
通常添加 0.05%~0.1% 的低濃度瓊脂，其作用是減緩培養(yǎng)基中氧氣的擴散速度，穩(wěn)定氧梯度，避免因震蕩導(dǎo)致氧氣分布均勻化。
3、營養(yǎng)基礎(chǔ)成分
含胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、葡萄糖等，提供微生物生長所需的碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)，滿足各類微生物的營養(yǎng)需求。
4、指示劑（可選）
部分配方添加亞甲藍或刃天青作為氧化還原指示劑：
有氧環(huán)境中呈藍色（亞甲藍）或粉紅色（刃天青）；
無氧環(huán)境中呈無色，可直觀判斷培養(yǎng)基的還原狀態(tài)和氧梯度位置。
二、TGC 培養(yǎng)基的使用方法
1、培養(yǎng)基的制備
配方（典型）：胰酪蛋白胨 15g、大豆蛋白胨 5g、葡萄糖 5g、氯化鈉 2.5g、硫代乙醇酸鈉 0.5g、瓊脂 0.75g、水 1000mL，pH 調(diào)至 7.2±0.2（25℃）。
制備步驟：
按配方稱量各成分，溶于蒸餾水中，加熱溶解；
分裝于試管（約 15mL / 管）或錐形瓶中，121℃高壓蒸汽滅菌 15 分鐘；
滅菌后趁熱直立放置，冷卻至室溫（此時瓊脂凝固，形成直立的柱狀培養(yǎng)基）；
若含指示劑，新鮮培養(yǎng)基應(yīng)呈無色或淡粉色（若表層氧化呈藍色 / 粉紅色，可在 80℃水浴中加熱 10 分鐘還原，冷卻后使用）。
2、接種方法
樣本類型：適用于臨床標本（如血液、膿液、組織勻漿）、食品樣品或環(huán)境樣品中各類微生物的培養(yǎng)。
操作步驟：
用無菌接種針或吸管取待檢樣本，垂直刺入培養(yǎng)基底部（避免過度攪動，防止破壞氧梯度）；
若為液體樣本，可直接滴加 1~2 滴于培養(yǎng)基表面或深層；
接種后輕輕混勻（僅表層輕微晃動），避免氧梯度紊亂。
3、培養(yǎng)條件
溫度：通常 35~37℃培養(yǎng)，部分微生物（如嗜冷菌）需調(diào)整至 20~25℃。
時間：根據(jù)目標菌生長速度而定，厭氧菌一般需培養(yǎng) 48~72 小時，需氧菌可在 24~48 小時觀察結(jié)果。
觀察指標：
需氧菌：多在培養(yǎng)基表層生長，形成渾濁或菌膜；
微需氧菌：在培養(yǎng)基中層（氧含量較低區(qū)域）生長；
厭氧菌：在培養(yǎng)基底層（無氧區(qū)域）生長，形成沉淀或渾濁。
4、注意事項
避免反復(fù)開蓋：接種和觀察時減少試管開蓋次數(shù)，防止氧氣大量進入破壞底層厭氧環(huán)境。
新鮮度：培養(yǎng)基需現(xiàn)配現(xiàn)用，存放時間不宜超過 1 周（4℃冷藏），若指示劑顯示表層氧化范圍過大（超過 1/3），需重新加熱還原后使用。
無菌操作：嚴格無菌操作，避免污染，否則可能掩蓋目標菌的生長。
三、應(yīng)用場景
微生物鑒定：通過細菌在培養(yǎng)基中的生長位置，初步判斷其氧需求類型（需氧、厭氧、微需氧）。
無菌檢查：用于藥品、生物制品的厭氧菌無菌性檢測，確保無厭氧致病菌污染。
TGC 培養(yǎng)基的核心優(yōu)勢在于 “一管多能”，無需單獨設(shè)置厭氧環(huán)境即可同時培養(yǎng)不同氧需求的微生物，操作簡便且成本低，是微生物實驗室常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項目準確到位，都有相關(guān)人士進行維護,確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因為此，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：大鼠甲狀旁腺細胞的形態(tài)特征與功能調(diào)控機制及研究方法！
下一篇：真菌培養(yǎng)基的工作原理與使用方法及具體制備流程！