核糖醇發(fā)酵管的核心成分與接種操作及結(jié)果判斷！
小楊 / 2025-08-01 09:26:06
核糖醇發(fā)酵管是微生物學(xué)中用于檢測微生物能否發(fā)酵核糖醇（一種多元醇類碳水化合物）的生化反應(yīng)管，通過觀察發(fā)酵過程中是否產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，輔助微生物的鑒定（尤其常用于腸道桿菌等的分類鑒別）。以下詳細(xì)介紹其原理和使用方法：
一、原理
1、核心成分：
發(fā)酵管內(nèi)含核糖醇（作為唯一碳源）、酸堿指示劑（如溴甲酚紫，中性時呈紫色，酸性時呈黃色），部分管內(nèi)還會加入倒置的小倒管（用于檢測是否產(chǎn)氣）。
2、反應(yīng)邏輯：
若微生物具有分解核糖醇的酶系，可通過發(fā)酵作用將核糖醇分解為丙酮酸等中間產(chǎn)物，進(jìn)一步代謝產(chǎn)生有機(jī)酸（如乳酸、乙酸），導(dǎo)致培養(yǎng)基 pH 下降。
若產(chǎn)酸：指示劑由紫色變?yōu)辄S色（陽性）。
若同時產(chǎn)氣：倒置小倒管內(nèi)會積聚氣泡（產(chǎn)氣陽性）。
若微生物不能分解核糖醇，則培養(yǎng)基保持紫色，無氣泡（陰性）。
二、使用方法
1、準(zhǔn)備工作
發(fā)酵管：采用滅菌的含糖醇發(fā)酵管（液體培養(yǎng)基），確保倒置小倒管內(nèi)無氣泡（若有氣泡需重新滅菌排氣）。
待檢菌：純培養(yǎng)的新鮮菌落（培養(yǎng) 18-24 小時，保證活性）。
2、接種操作
用滅菌接種環(huán)挑取單個純菌落，輕輕伸入發(fā)酵管液體中，研磨混勻（避免試管口污染）。
每株菌至少接種 1 支，同時設(shè)置未接種的空白對照管（觀察是否污染）。
3、培養(yǎng)
將接種后的發(fā)酵管置于35-37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
觀察時間：多數(shù)菌在 24-48 小時內(nèi)出現(xiàn)結(jié)果；若為陰性，需延長至 7 天（部分菌發(fā)酵緩慢）。
4、結(jié)果判斷
產(chǎn)酸：培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色（+）；不變色（-）。
產(chǎn)氣：倒置小倒管內(nèi)有氣泡（不論氣泡大小，只要可見即為 +）；無氣泡（-）。
結(jié)果記錄格式：例如“產(chǎn)酸產(chǎn)氣（A+G+）”“只產(chǎn)酸（A+G-）”“不發(fā)酵（A-G-）”。
三、注意事項
接種時需嚴(yán)格無菌操作，避免雜菌污染導(dǎo)致假陽性。
若培養(yǎng)時間不足（如 24 小時內(nèi)陰性），不可直接判定為陰性，需延長培養(yǎng)至 7 天。
部分細(xì)菌可能僅微弱產(chǎn)酸，需仔細(xì)對比對照管判斷顏色變化（避免誤判）。
不同微生物對核糖醇的發(fā)酵能力具有特異性，例如某些
沙門氏菌可發(fā)酵核糖醇，而
志賀氏菌多為陰性，可作為鑒別依據(jù)。
通過核糖醇發(fā)酵試驗，可結(jié)合其他生化反應(yīng)（如葡萄糖發(fā)酵、乳糖發(fā)酵等），更精準(zhǔn)地對微生物進(jìn)行分類鑒定。
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