酚紅肉湯培養(yǎng)基的常見污染類型分析及具體判斷方法！
小楊 / 2025-07-29 08:58:58
百歐博偉生物：判斷
酚紅肉湯培養(yǎng)基是否被污染，需結(jié)合外觀變化、對照試驗結(jié)果及培養(yǎng)后的異常表現(xiàn)綜合判斷，核心是識別“非目標微生物生長”或“培養(yǎng)基自身異常變質(zhì)”的特征。以下是具體判斷方法及常見污染類型分析：
一、未接種前（儲存或滅菌后）的污染判斷
未接種的培養(yǎng)基若出現(xiàn)以下情況，可能已被污染或變質(zhì)，不可使用：
1、外觀渾濁或沉淀
正常狀態(tài)：滅菌后應為澄清透明液體（或輕微均勻渾濁，因成分差異略有不同，但無顆粒感），顏色為酚紅的橙紅色（中性）。
污染特征：
出現(xiàn)不均勻渾濁（如底部有絮狀沉淀、懸浮顆粒，或整體渾濁且透光性差）。
有異物漂浮（如霉斑、白色 / 綠色菌絲、黑點等，多為真菌污染）。
2、顏色異常變化
正常狀態(tài)：未接種時顏色穩(wěn)定（橙紅色），即使冷藏儲存，顏色也不應明顯改變。
污染特征：
未接種卻變黃（可能因雜菌在儲存中繁殖產(chǎn)酸）或變紅（少數(shù)產(chǎn)堿菌污染）。
顏色發(fā)灰、發(fā)暗（非酚紅正常色澤，可能是細菌代謝物或腐敗變質(zhì)）。
3、異味
正常狀態(tài)：只有培養(yǎng)基本身的淡淡蛋白胨氣味，無酸臭、腐敗味等異常氣味。
污染特征：打開試管后聞到酸臭味、霉味或腐臭味（雜菌代謝產(chǎn)物導致）。
二、接種后培養(yǎng)過程中的污染判斷
接種后若出現(xiàn)以下情況，需結(jié)合“空白對照”和“目標菌生長特性”判斷是否污染：
1、空白對照異常
關(guān)鍵原則：每次試驗需設置未接種的空白培養(yǎng)基對照（與接種組同批次、同條件培養(yǎng)）。
污染判斷：若空白對照出現(xiàn)以下變化，說明培養(yǎng)基本身或操作過程污染：
空白對照渾濁、顏色改變（變黃 / 變紅）。
空白對照中杜氏小管（若有）出現(xiàn)氣泡（非目標菌產(chǎn)氣）。
2、接種組與預期結(jié)果不符
若已知目標菌的生長特性（如只分解葡萄糖不分解乳糖），但結(jié)果出現(xiàn)矛盾，可能是污染：
例 1：目標菌應為“不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣”，但培養(yǎng)基變黃且渾濁（可能混入產(chǎn)酸菌）。
例 2：目標菌為純培養(yǎng)菌落接種，卻同時出現(xiàn)產(chǎn)酸和產(chǎn)堿兩種顏色變化（雜菌混合生長）。
3、生長速度或形態(tài)異常
目標菌通常在特定時間內(nèi)生長（如 18-24 小時），若接種后幾小時內(nèi)快速渾濁（遠超正常生長速度），或培養(yǎng)后期突然出現(xiàn)二次渾濁 / 顏色改變（非目標菌遲發(fā)型繁殖），可能是污染。
三、常見污染原因及對應特征
不同污染來源的表現(xiàn)有一定差異，可輔助判斷污染途徑：
污染類型 常見原因 典型特征
滅菌不徹底 滅菌溫度 / 時間不足、裝量過多 未接種即渾濁，多為細菌污染（均勻渾濁）
操作污染 接種時未無菌操作 接種組污染，空白對照正常；可能出現(xiàn)多種形態(tài)雜菌
儲存污染 試管塞松動、冷藏環(huán)境不潔 冷藏后出現(xiàn)霉斑（真菌）或液面漂浮物
培養(yǎng)基變質(zhì) 儲存過久、反復凍融 顏色變暗、沉淀分層，無明顯微生物生長跡象
四、注意事項
優(yōu)先參考空白對照：空白對照是判斷污染的“金標準”—— 若空白對照正常，接種組的異常更可能是目標菌自身特性（而非污染）；若空白對照異常，所有結(jié)果均無效。
排除非污染因素：
培養(yǎng)基滅菌后冷卻時，若試管內(nèi)壁有凝結(jié)水珠，搖勻后可能暫時渾濁，靜置后澄清（非污染）。
部分細菌生長時會導致培養(yǎng)基均勻渾濁（如
大腸桿菌），這是正常生長表現(xiàn)，需結(jié)合顏色和對照判斷。
污染后的處理：確認污染的培養(yǎng)基需高壓滅菌后再廢棄（121℃滅菌 30 分鐘），避免污染環(huán)境；同時排查污染源頭（如滅菌設備、操作流程、儲存條件）。
通過以上方法，可準確判斷
酚紅肉湯培養(yǎng)基是否被污染，確保試驗結(jié)果的可靠性。核心邏輯是：“未接種時無異常、接種后與空白對照一致、符合目標菌特性”即為正常，反之則可能污染。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的
微生物菌種查詢網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務,是中國微生物菌種保藏中心的服務平臺，并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網(wǎng)站，自設設備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心！歡迎廣大客戶來詢！
下載附件
上一篇：自然風干和噴霧干燥在土壤微生物研究中有哪些優(yōu)缺點？
下一篇：肺炎克雷伯菌肺炎亞種的生物學特性與臨床特點及預防措施！