甘油生化管在非發(fā)酵革蘭陰性桿菌檢測(cè)中的具體應(yīng)用！
小楊 / 2025-07-24 09:45:30
非發(fā)酵革蘭陰性桿菌（如
假單胞菌屬、
不動(dòng)桿菌屬、
伯克霍爾德菌屬等）是醫(yī)院感染的重要致病菌，其核心特征是不發(fā)酵葡萄糖，但對(duì)其他碳源（如甘油）的利用能力存在顯著差異。甘油生化管通過檢測(cè)這類細(xì)菌對(duì)甘油的發(fā)酵（或氧化）能力，成為輔助鑒別和鑒定的關(guān)鍵工具。以下是其具體應(yīng)用：
一、核心原理（針對(duì)非發(fā)酵菌）
非發(fā)酵菌多數(shù)不能通過發(fā)酵途徑分解葡萄糖，但部分菌株可通過氧化或發(fā)酵方式利用甘油產(chǎn)生酸，導(dǎo)致培養(yǎng)基 pH 下降，pH 指示劑（如溴甲酚紫）變色。甘油生化管通過觀察顏色變化（及是否產(chǎn)氣），區(qū)分不同非發(fā)酵菌的代謝特性：
陽性反應(yīng)：細(xì)菌能利用甘油產(chǎn)酸，培養(yǎng)基由紫變黃；
陰性反應(yīng)：不能利用甘油，培養(yǎng)基保持紫色不變。
二、主要非發(fā)酵菌的鑒別應(yīng)用
1、假單胞菌屬的區(qū)分
假單胞菌屬是臨床最常見的非發(fā)酵菌，不同種對(duì)甘油的利用差異明顯：
銅綠假單胞菌：絕大多數(shù)菌株不能利用甘油（甘油陰性），結(jié)合其“氧化酶陽性、產(chǎn)綠膿素、有特殊生姜?dú)馕?rdquo;等特征，可快速初步鑒定（臨床中銅綠假單胞菌占假單胞菌感染的 70% 以上，此指標(biāo)可縮小鑒定范圍）。
熒光假單胞菌：多數(shù)能緩慢發(fā)酵甘油（陽性），且在紫外線下產(chǎn)生熒光素，可與銅綠假單胞菌（甘油陰性 + 無熒光）區(qū)分。
惡臭假單胞菌：甘油陰性，且氧化酶陽性、不產(chǎn)色素，結(jié)合其“有惡臭氣味”的特點(diǎn)，可與其他假單胞菌鑒別。
2、伯克霍爾德菌屬的鑒定
洋蔥伯克霍爾德菌：能發(fā)酵甘油產(chǎn)酸（陽性），且氧化酶試驗(yàn)陽性、能還原硝酸鹽，這一特性可與其他非發(fā)酵菌（如不動(dòng)桿菌）區(qū)分。該菌對(duì)多種抗生素耐藥，常引起囊性纖維化患者或免疫低下者感染，準(zhǔn)確鑒定對(duì)治療至關(guān)重要。
類鼻疽伯克霍爾德菌：可緩慢發(fā)酵甘油產(chǎn)酸，結(jié)合其“在血平板上呈黏液型菌落、氧化酶陽性”等特征，有助于與假單胞菌區(qū)分（類鼻疽伯克霍爾德菌是類鼻疽病的病原菌，需高度警惕）。
3、不動(dòng)桿菌屬與其他菌屬的鑒別
不動(dòng)桿菌屬：多數(shù)菌株不能利用甘油（甘油陰性），且氧化酶試驗(yàn)陰性、動(dòng)力陰性，這一組合特征可與“甘油陽性 + 氧化酶陽性”的伯克霍爾德菌屬、部分假單胞菌屬區(qū)分。
例如：
鮑曼不動(dòng)桿菌（臨床最常見不動(dòng)桿菌）表現(xiàn)為“甘油陰性 + 氧化酶陰性 + 葡萄糖氧化陽性”，而洋蔥伯克霍爾德菌為“甘油陽性 + 氧化酶陽性 + 葡萄糖氧化陽性”，兩者通過甘油試驗(yàn)可快速區(qū)分。
4、其他非發(fā)酵菌的輔助鑒別
窄食單胞菌屬（如
嗜麥芽窄食單胞菌）：多數(shù)不發(fā)酵甘油（陰性），但可通過其他特性進(jìn)一步確認(rèn)，甘油試驗(yàn)可排除部分甘油陽性菌。
產(chǎn)堿桿菌屬：通常不能利用甘油（陰性），且氧化酶陽性、動(dòng)力陽性，結(jié)合甘油試驗(yàn)可與能利用甘油的菌株區(qū)分。
三、檢測(cè)操作要點(diǎn)（針對(duì)非發(fā)酵菌）
接種前純化：非發(fā)酵菌常從臨床標(biāo)本（如痰、血液、尿液）中分離，需先通過血平板或麥康凱平板獲得純培養(yǎng)單菌落（避免雜菌干擾，尤其是混有發(fā)酵菌時(shí)）。
接種方法：用無菌接種環(huán)挑取新鮮單菌落（培養(yǎng) 24-48 小時(shí)），穿刺或混勻于甘油生化管中（若含杜氏小管，需確保初始無氣泡）。
培養(yǎng)條件：
溫度：35-37℃（部分菌株需 28℃，如類鼻疽伯克霍爾德菌）；
時(shí)間：多數(shù) 24-48 小時(shí)可觀察結(jié)果，慢反應(yīng)菌株（如
伯克霍爾德菌）需延長(zhǎng)至 5-7 天，避免漏判。
結(jié)果判斷：
陽性：培養(yǎng)基由紫變黃（產(chǎn)酸）；
陰性：顏色不變（仍為紫色）；
注意：非發(fā)酵菌產(chǎn)氣能力極弱，杜氏小管中氣泡罕見，主要以顏色變化為判斷核心。
四、與其他試驗(yàn)的聯(lián)合應(yīng)用
非發(fā)酵菌的鑒定需結(jié)合多項(xiàng)指標(biāo)，甘油試驗(yàn)需與以下試驗(yàn)聯(lián)合判斷，提高準(zhǔn)確性：
菌屬/種 甘油發(fā)酵試驗(yàn) 氧化酶 葡萄糖氧化 其他關(guān)鍵特征
銅綠假單胞菌 陰性 陽性 陽性 產(chǎn)綠膿素、有生姜味
五、臨床意義
非發(fā)酵菌常引起免疫低下患者的嚴(yán)重感染（肺炎、敗血癥等），且耐藥性強(qiáng)（如
多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌、
銅綠假單胞菌）。甘油生化管通過快速區(qū)分其代謝特性，可縮短鑒定時(shí)間，為早期選擇敏感抗生素（如伯克霍爾德菌對(duì)復(fù)方新諾明敏感，而鮑曼不動(dòng)桿菌可能需多粘菌素）提供重要依據(jù)，降低感染死亡率。
綜上，甘油生化管在非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的檢測(cè)中，通過精準(zhǔn)反映碳源利用差異，成為細(xì)菌分類鑒定的“階梯式”工具，與其他生化試驗(yàn)聯(lián)合，為臨床病原菌的快速識(shí)別和治療指導(dǎo)提供了關(guān)鍵支持。
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