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硫酸鹽還原菌是一種厭氧的微生物。廣泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油氣井等缺氧環(huán)境中。ATCC菌種 據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，S R B 目前已有1 2 個(gè)屬4 0 多個(gè)種 ，S R B 的分類學(xué)研究進(jìn)展比較緩慢。目前已知的S R B 從生理學(xué)上分為兩大亞類
Ⅰ類
如脫硫弧菌屬、脫硫單胞菌屬、脫硫葉菌屬和脫硫腸狀菌屬，其特點(diǎn)是可利用乳酸、丙酮酸、乙醇或某些脂肪酸為碳源及能源，將硫酸鹽還原為硫化氫；
Ⅱ類
如脫硫菌屬、脫硫球菌屬、脫硫八疊球菌屬和脫硫線菌屬，它們的特別之處是可以氧化脂肪酸，并將硫酸鹽還原為硫?，F(xiàn)在，隨著研究的進(jìn)展，陸續(xù)又有一些新的種屬被命名。
培養(yǎng)條件
雖然從理論上講，SRB為嚴(yán)格的厭氧菌，但隨著研究的深入，已有研究結(jié)果表明SRB并非嚴(yán)格意義上的絕對(duì)厭氧，而是兼性厭氧。但總體上來(lái)說(shuō)，SRB對(duì)氧還是極其敏感的，因此對(duì)其培養(yǎng)與分離關(guān)鍵要采用嚴(yán)格的厭氧技術(shù)培養(yǎng)SRB不僅僅要求周圍生長(zhǎng)的環(huán)境是無(wú)氧的，還有培養(yǎng)基中氧化還原電位必須在-100mV以下。
所以通常在培養(yǎng)基中加入一些強(qiáng)還原劑，如巰基乙醇、抗壞血酸、L2半胱氨酸鹽酸鹽，這些物質(zhì)受熱容易分解，所以要采用過(guò)濾除菌的方法單獨(dú)滅菌
溫度
⑴中溫型：30-40 ℃ 之 間
⑵高溫型：55-60 ℃ 之 間
PH值
為5-10內(nèi)均能生存，最佳pH值在7-8之間
判斷生成標(biāo)志
是在加有二價(jià)鐵鹽的培養(yǎng)基中，液體培養(yǎng)基表現(xiàn)為全部變黑；而固體培養(yǎng)基在有二價(jià)鐵鹽的存在下則有黑色的菌落生成。
培養(yǎng)方法
1、固體培養(yǎng)法
（1）稀釋搖管法
稀釋搖管法是稀釋倒平板法的一種變通形式，先將一系列盛有無(wú)菌瓊脂培養(yǎng)基的試管加熱使瓊脂熔化并保持在50℃左右，將已稀釋成不同梯度的菌液加入到這些已熔化好的瓊脂試管中，迅速充分混勻。待凝后,在瓊脂柱表面倒一層滅菌的液體石蠟和固體石蠟的混合物，使培養(yǎng)基盡量隔絕空氣。培養(yǎng)后，菌落形成在瓊脂柱的中間。
困難之處在于菌落的挑取，首先需用一只滅菌針將覆蓋的石蠟蓋取出，然后再用一只毛細(xì)管插入瓊脂和管壁之間，吹入無(wú)菌無(wú)氧氣體，將瓊脂柱吸出，放在培養(yǎng)皿中，最后用無(wú)菌刀將瓊脂柱切成薄片進(jìn)行觀察并轉(zhuǎn)移菌落。
該法的不足之處是觀察與挑取菌落比較困難，但在缺乏專業(yè)設(shè)備的條件下，此法仍是一種方便有效地進(jìn)行厭氧微生物分離、純化和培養(yǎng)的低成該方法。
（2）Hungate滾管技術(shù)
Hungate滾管技術(shù)是培養(yǎng)厭氧菌最佳的方法。滾管技術(shù)是美國(guó)微生物學(xué)家亨蓋特于1950年首次提出并應(yīng)用于瘤胃厭氧微生物研究的一種厭氧培養(yǎng)技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)又經(jīng)歷了幾十年的不斷改進(jìn)，從而使亨蓋特厭氧技術(shù)日趨完善，并逐漸發(fā)展成為研究厭氧微生物的一套完整技術(shù)。目前國(guó)內(nèi)外很多專門做厭氧培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室大都采用此技術(shù)。
Hungate滾管技術(shù)是指將適當(dāng)稀釋度的菌液，在無(wú)菌無(wú)氧條件下接入含有瓊脂培養(yǎng)基的厭氧試管中，然后將其在滾管機(jī)或冰盤上均勻滾動(dòng)，使含菌培養(yǎng)基均勻地凝固在試管內(nèi)壁上。當(dāng)瓊脂繞管壁完全凝固后，瓊脂試管即可垂直放置貯存，并可使少量的水分集中在底部，經(jīng)過(guò)幾天的培養(yǎng)后，就可見(jiàn)到厭氧管內(nèi)固體培養(yǎng)基內(nèi)部和表面有菌落出現(xiàn)。挑取菌落時(shí)也很方便，可以在酒精燈旁用自制的玻璃細(xì)管接種針挑取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的菌落，快速接到液體培養(yǎng)基中富集培養(yǎng)。
Hungate滾管技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于，培養(yǎng)基可以在厭氧管內(nèi)壁上形成一層均勻透明的薄層，同時(shí)菌落可以埋藏在培養(yǎng)基內(nèi)部或生長(zhǎng)在表面，同平板涂布法相比，與氧氣接觸的機(jī)會(huì)大大減少。
（3）疊皿夾層法
疊皿夾層法實(shí)質(zhì)是將菌夾在上下兩層培養(yǎng)基之間，使其造成一個(gè)相對(duì)無(wú)氧的環(huán)境，從而使SRB能在夾縫中生長(zhǎng)。
具體做法是將已經(jīng)富集好的菌液采用無(wú)菌操作技術(shù)稀釋成不同濃度。將含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%瓊脂的固體培養(yǎng)基熔化并保持在50℃左右，在無(wú)菌條件下，向培養(yǎng)皿（90mm×15mm）的皿蓋中倒入約1/3高度的固體培養(yǎng)基，待其剛剛冷凝后，將不同濃度的稀釋液吸取適量，快速涂布平板上，使稀釋液滲透約30s后，在培養(yǎng)皿的中間位置倒入同種營(yíng)養(yǎng)型固體培養(yǎng)基，直到將溢未溢的突起狀態(tài)，隨后迅速蓋上皿蓋并往下壓，最終皿內(nèi)不能有氣泡。
去掉培養(yǎng)皿內(nèi)外兩層側(cè)壁間多余的瓊脂，并在其中灌入適量熔化的石蠟，使培養(yǎng)皿側(cè)壁縫隙被石蠟密封，盡量不要留有氣泡。培養(yǎng)一周后，在加有二價(jià)鐵離子的平板中會(huì)長(zhǎng)出黑色的SRB菌落，在酒精燈旁加熱使固體石蠟熔化，由于上下兩層培養(yǎng)基凝固時(shí)間不同，所以當(dāng)移去內(nèi)皿后，用鑷子很容易將上層培養(yǎng)基揭起，從而露出下層培養(yǎng)基的菌落。當(dāng)需要進(jìn)行菌落挑取時(shí),可以對(duì)其進(jìn)行切塊轉(zhuǎn)移，放入液體培養(yǎng)基時(shí)搗碎即可。
該方法的優(yōu)點(diǎn)是培養(yǎng)物均采用涂布或劃線生長(zhǎng)于營(yíng)養(yǎng)瓊脂夾層中，取菌落時(shí)可很方便地做到定點(diǎn)取菌，同時(shí)該方法不需要另外創(chuàng)建一個(gè)無(wú)氧環(huán)境，故省時(shí)、省力，具備了所有好氧、厭氧分離方法的優(yōu)點(diǎn)。
2、液體培養(yǎng)法
液體培養(yǎng)SRB，首先排除培養(yǎng)基內(nèi)的空氣，可以采用高純氮?dú)獯得撆囵B(yǎng)基內(nèi)的空氣以及使培養(yǎng)基加熱的方法，然后接入適量菌液，在適宜的溫度下靜置培養(yǎng)。若在培養(yǎng)基上方覆蓋一層滅過(guò)菌的液體石蠟效果更佳！