ATCC菌種NCTC空腸彎曲菌怎樣增菌分離和鑒定？
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-09-19 10:11:52
ATCC菌種NCTC空腸彎曲菌怎樣增菌分離和鑒定？
NCTC空腸彎曲菌在普通培養(yǎng)基上難以生長，在凝固血清和血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)36小時可見無色半透明毛玻璃樣小菌落，單個菌落呈中心凸起，周邊不規(guī)則，無溶血現(xiàn)象?？漳c彎曲生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類，不分解尿素，靛基質(zhì)陰性?？蛇€原硝酸鹽，氧化酶和過氧化氫酶為陽性。能產(chǎn)生微量或不產(chǎn)生硫化氫，甲基紅和vp試驗陰性，枸椽酸鹽培養(yǎng)基中不生長,在彎曲菌中唯一馬尿酸呈陽性反應(yīng)。
空腸彎曲菌增菌
在增菌過程中，F(xiàn)DA、USDA、ISO都有前增菌，而GB和SN中均沒有.前增菌結(jié)束后，其他方法直接轉(zhuǎn)入42℃增菌階段，而USDA方法推薦加入頭孢哌哃，這與其他方法不同中。通過比較發(fā)現(xiàn)，樣品的前處理和增菌對提高樣品的分離率很重要。
分離培養(yǎng)
取服用抗生素前的腹瀉糞便或?qū)m頸粘液等，短時間用棉拭子沾取樣品將樣品放如內(nèi)加入萬古霉素10mg,多粘菌素B 2500iu，amphoterin 13mg,cephalocin 15mg的肉湯中進行增菌培養(yǎng)，后接種于哥倫比亞血(5%脫纖維綿羊血)平板上,培養(yǎng)24H觀察,如果有雜菌則選取單個菌株純化,后使用馬尿酸和氧化酶檢測,有條件可以做血清凝集試驗(成本高).初篩將陽性以及疑似菌株進行PCR檢測(16S,mapA,hipO)最終確定為空腸彎曲菌。FDA和USDA方法在增菌液接種平板時，都有稀釋步驟。SN采用以0.65μm孔徑濾膜過濾除雜菌的方法。GB和ISO方法則直接接種平板。 但在接種培養(yǎng)時，唯有ISO方法提出同時接種兩種（一種無血，一種有血）平板。
鑒定
鑒定過程中，都有初步鑒定和最終鑒定，初步鑒定主要以少數(shù)典型生化反應(yīng)和菌體形態(tài)來判斷為彎曲菌屬，在此程中各方法不完全一致。但鑒定過程中所采用的生化反應(yīng)基本相同。通過初步鑒定可以減少工作量，建議在鑒定過程中，先對所得菌株進行初步鑒定，先確定為彎曲菌后，再統(tǒng)一進行進一步生化鑒定。