細(xì)胞凍存方法與復(fù)蘇中國(guó)微生物菌種查詢(xún)網(wǎng)為您解答：
一）細(xì)胞凍存方法
將貼壁細(xì)胞消化后離心收集，懸浮細(xì)胞直接離心收集，以完全培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過(guò)夜。次日保存到液氮中。
二）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
應(yīng)遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37~37.5℃，取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化。
1000g離心5min，棄上清，加入1ml新鮮完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
在無(wú)菌臺(tái)內(nèi)取適量完全培養(yǎng)基加入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，然后用無(wú)菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞，置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃，使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
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