細(xì)胞系描述
微生物菌種查詢網(wǎng)編號(hào)：KCB200770YJ
細(xì)胞株名稱(chēng)：BV-2 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
種屬：小鼠
組織來(lái)源：腦
生長(zhǎng)特性：半貼壁生長(zhǎng)
形態(tài)特征：成纖維樣細(xì)胞
支原體檢測(cè)：陰性（-）
細(xì)胞系特性：此細(xì)胞源自C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞。表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因；膜表面表達(dá)envgp70抗原；在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征；2n=57-66 。
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件：完全培養(yǎng)基：80%RPMI1640（含2mM L-glutamine）+20%胎牛血清
培養(yǎng)溫度：37.0C CO2：5%
傳代方法：收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況并按以下步驟處理：
1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶，放入無(wú)菌工作臺(tái)中，嚴(yán)格無(wú)菌操作。
2.將培養(yǎng)液全部吸入離心管，離心（1000轉(zhuǎn)/min,10min）。
3.加入10ml新鮮的完全培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁的細(xì)胞按以下步驟處理：
1. 收集培養(yǎng)液后，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后將培養(yǎng)瓶翻過(guò)來(lái)讓胰酶與細(xì)胞面接觸大約10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。
4. 以后細(xì)胞傳代均按以上方法操作。
注：
1、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用, 請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
2、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
3、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。
凍存方法：凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存
相關(guān)參考文獻(xiàn)1．Ghosh D,Mishra MK,Das S,et al. Tobacco carcinogen induces microglial activation and subsequent neuronal damage .J Neurochem,2009,110(30:1070-1081.
2．Kjaer K,StrΦbaek D,Christophersen P,et al.Chloride channel blockers inhibit iNOS expression and NO production in IFNgamma-stimulated microglial BV2 cells . Brain Res,2009,1281:15-24.
3．Kim YJ,Hwang JS,et al.C6 glioma cell insoluble matrix components enhance interferon-gamma-stimulated inducible nitric-oxide synthase/nitric oxide production in BV2 microglial cells.J Biol Chem , 2008, 283(5):2526-2533.
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