| 名稱 | PichiaPinkStrain4酵母,Pink4釀酒彩虹酵母 |
| 菌株類型 | 畢赤酵母，彩虹酵母 |
| 培養(yǎng)基 | PDA培養(yǎng)基 |
| 生長條件 | 30℃,有氧 |
| 基因型: | ade2 |
| 表型 | Ade2- |
| 抗性 | 氨芐和卡那 |
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件 | 電轉(zhuǎn) |
| 應(yīng)用 | 酵母蛋白表達，真核細(xì)胞蛋白表達 |
| 菌株特點 |
PichiaPinkStrain4是畢赤酵母Pink菌株，屬于真核細(xì)胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細(xì)菌菌的污染和生長。 PichiaPinkStrain4酵母適宜的生長溫度是24-30度，溫度超過32度對于細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達是毀滅性災(zāi)難，可能導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。 ADE2基因編碼磷酸核糖甲酰胺咪唑羧化酶基因，該基因能夠催化嘌呤核苷酸合成的第六步反應(yīng)。在釀酒酵母，畢赤酵母，或者其他酵母中，這個基因的突變或缺失能夠?qū)е锣堰是绑w在酵母細(xì)胞內(nèi)液泡內(nèi)的積累，使得細(xì)胞呈現(xiàn)粉紅色。 Pink4酵母菌株是ade2營養(yǎng)缺陷型，細(xì)胞內(nèi)的ade2基因被缺失，部分ade2啟動子也被缺失，所以菌株在缺乏腺嘌呤（adenine）的培養(yǎng)基中無法生長，而且在富培養(yǎng)基中生長緩慢。將含有ade2基因的表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入該菌株中后，能夠使得菌株獲得在腺嘌呤缺乏的培養(yǎng)基中生長，而且菌株顏色由ade2基因缺失時的粉紅色恢復(fù)為白色。從而間接的指明那些克隆菌株轉(zhuǎn)化質(zhì)粒成功。 配套載體是pPinkα-HC,pPink-HC或者pPink-LC。 |
