| 啟動子 | T7/lac |
| 復(fù)制子 | ColE1 ori，F(xiàn)1 ori |
| 終止子 | T7 terminator |
| 質(zhì)粒分類 | 大腸桿菌載體；PET系列表達(dá)質(zhì)粒 |
| 質(zhì)粒大小 | 5933bp |
| 質(zhì)粒標(biāo)簽 | N-GST, N-6×His, N-Thrombin |
| 原核抗性 | 卡那霉素Kan |
| 克隆菌株 | DH5α |
| 培養(yǎng)條件 | 37℃，有氧，LB |
| 表達(dá)宿主 | BL21(DE3) |
| 誘導(dǎo)方式 | IPTG或乳糖及其類似物 |
| 5'測序引物 | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3'測序引物 | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
| 質(zhì)粒簡介 | pET41系列載體是設(shè)計(jì)用來克隆和高水平表達(dá)蛋白質(zhì)的載體，載體融合表達(dá)一個含有220個氨基酸的GST標(biāo)簽蛋白純化片段。pET41a載體的單一的多克隆位點(diǎn)見上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意：載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的，所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。 T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的，所以在T7噬菌體聚合酶的作用下，包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生，并啟動蛋白表達(dá)，同時蛋白表達(dá)將被T7終止子序列的作用下終止蛋白翻譯。pET-41a載體上面含有一個EK蛋白酶切位點(diǎn)，當(dāng)將目的基因使用載體上面的PshAI限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)插入進(jìn)去時，可以通過EK蛋白酶將載體上的融合的所有氨基酸序列包括GST標(biāo)簽序列， |
