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平臺(tái)編號(hào)：bio-53694
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細(xì)胞信息： PCK
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規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
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用途：國(guó)內(nèi)
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服務(wù)費(fèi)用：
加載中…… - 訂購(gòu)
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注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
大黃魚(yú)腎細(xì)胞
細(xì)胞系包裹收到后，請(qǐng)按下列方法操作。
①培養(yǎng)基：complete growth medium: Minimum essential medium (Eagle) with 2 mM L-glutamine and Earle's BSS adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate, 0.1 mM non-essential amino acids, and 1.0 mM sodium pyruvate, 90%; fetal bovine serum, 10% ,Temperature: 25-28C 如果沒(méi)有CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)基中需加入5克/升HEPES。
②。瓶?jī)?nèi)含5%FBS，請(qǐng)補(bǔ)加至10%FBS
一．貼壁細(xì)胞
1．嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
2．將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)50ml培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（此培養(yǎng)基可再用）。
3．加入消化液1～1.5ml，37℃消化直到細(xì)胞脫落。
4．換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，加入步驟2的培養(yǎng)基8ml，再在25℃，5％CO2下培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1．嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
2．將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)50ml培養(yǎng)基用吸管移到離心管中。（嚴(yán)禁直接傾倒）
3．在1000rpm，10min離心。
4．將上清吸到另一無(wú)菌容器中，（此培養(yǎng)基可再用）。
5．對(duì)沉淀用步驟4的培養(yǎng)基再懸浮。
6．換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，加入細(xì)胞培養(yǎng)瓶，在25℃，5％CO2下培養(yǎng)。
三．半貼壁細(xì)胞
1．參照上述1、2操作。
四．二毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。
1．此管內(nèi)細(xì)胞濃度在1-5 X 105個(gè)，將24孔克隆板的一排6孔每孔內(nèi)加1毫升培養(yǎng)基；
2．將小管無(wú)菌開(kāi)啟，細(xì)胞吸入第1孔內(nèi)，倍比稀釋至2孔，再倍比稀釋至3孔，最后至6孔；
3．在25℃，5％CO2下培養(yǎng)，1周內(nèi)應(yīng)有某孔至細(xì)胞生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，取出細(xì)胞至T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，常規(guī)培養(yǎng)。
