穩(wěn)定表達Ovalbumin基因的細胞株
細胞名稱: 示蹤穩(wěn)定細胞株
規(guī)格: T25
形態(tài)特征: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁
貨期: 2周【培養(yǎng)條件】RPMI 1640(Gibco cat:11875,或同配方) 10%胎牛血清
【推薦培養(yǎng)試劑】
【傳代比例】1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】消化2-3分鐘
【換液頻率】2~3天換液1次
【凍存液配方】RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】++
【培養(yǎng)要點】使用DMEM高糖培養(yǎng)基會使細胞大量產(chǎn)生黑色素
【特征特性】該細胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤,可以產(chǎn)生黑色素,同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進行觀察,標記后的細胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。
正常培養(yǎng)過程中定期(一個月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。